Wie wird das Embryo-Grading durchgeführt

WIE WIRD DAS EMBRYO-GRADING DURCHGEFÜHRT?

Bei IVF-Behandlungen klassifizieren Embryologen jeden Tag nach bestimmten Kriterien von der Entnahme der Eizelle bis zur Entwicklung des Embryos vom Tag 0 bis zum Tag 6. Das Hauptziel hierbei ist es, den Embryo mit dem höchsten Wachstumspotenzial zu erreichen, der als die höchste Wahrscheinlichkeit einer Schwangerschaft gilt.

WIE WIRD DAS 0. TAG GRADING DURCHGEFÜHRT?

Der Tag der Eizellenentnahme (ovo) wird als Tag 0 angesehen. Prozeduren an diesem Tag können wie folgt aufgelistet werden: Die Eizellen werden gesammelt und auf speziellen Geräten 3 Stunden im Labor ruhen gelassen. Die Denudation wird von den umgebenden Zellen gereinigt und nach ihrer Reife klassifiziert, wobei in jede reife Eizelle eine Samenzelle eingebracht wird, dh eine Mikroinjektion.

WELCHE EIZELLEN KÖNNEN MIKROINJEKTIERT WERDEN?  

Zur Befruchtung müssen die Eizellen ausgereifte MII (Metaphase-II-Eizelle) sein, dh die meiotische Teilung hat die 2. Phase erreicht.

WIE BESTIMMT MAN DIE REIFE VON EIZELLEN?

GV (GERMINAL VESICULAR) EIZELLEN: Diese Eizellen sind unreife Eizellen, die noch keine Meiose begonnen haben. Diese Zellen können nicht befruchtet werden.

MI (METAPHASE I) EIZELLEN:Dies sind unreife Eizellen, die in der ersten Phase der Meiose stehen geblieben sind. Wenn sie nicht reif genug sind, können sie durch Warten von 4 Stunden unter geeigneten Bedingungen gereift und gedüngt werden.

MII (METAPHASE II) EIZELLENS:Dies sind reife Eizellen, die in der zweiten Phase der Meiose zur Befruchtung bereit sind.

GV EIZELLE                                                           MI EIZELLE

MII EIZELLE

WIE BESTIMMT MAN, OB EIZELLEN VON GUTER, MITTLERER ODER SCHLECHTER QUALITÄT SIND?

GUTE QUALITÄT EIZELLEN:

• Transparentes Zytoplasma und normale Form
• Einfacher und glatter Polkörper
• Äußere Schicht von transparenter und normaler Dicke (zona pellucida)

MITTLERE QUALITÄT EIZELLEN:

• Leicht granuliertes Zytoplasma und / oder deformierte Form
• Polkörper in fragmentierter und abnormaler Morphologie
• Mild pigmentierte deformierte Außenschicht
• Zytoplasmatische Körper
• Ablagerungen im Perivitellienbereich (zwischen der Eizellenmembran und der Außenschicht)

SCHLECHTE QUALITÄT EIZELLEN:

• Dunkles / körniges / deformiertes Zytoplasma
• Polkörper in fragmentierter und abnormaler Morphologie
• Pigmentierte / dicke Zone
• Vakuolen
• Perivitellin-Trümmer

WIE WIRD DIE BEFRUCHTUNGSKONTROLLE AM 1. TAG DURCHGEFÜHRT?

Nach der Befruchtung kann eine Imprägnierung von 16-22 beobachtet werden. Befruchtung ist im Grunde die Kombination des Kerns aus einem Sperma und des Kerns aus der Eizelle. Für eine normale Befruchtung ist es erforderlich, zwei Vorkerne und zwei Polkörper sowohl von Männern als auch von Frauen zu sehen. Das Vorhandensein eines oder mehrerer Vorkerne wird als abnormale Befruchtung bezeichnet.

Bewertungskriterien in dieser Entwicklungsphase:

• Anzahl, Größe und Position der Vorkerne
• Anzahl, Verteilung und Größe der Nukleolusvorläuferkörper (NPB)
• Anzahl und Lage der Polkörper

Normalerweise befruchtete Eizellen (2PN und 2 Polkörper)

WIE WIRD DAS 2.-3. TAG EMBRYO-GRADING DURCHGEFÜHRT?

Am zweiten Entwicklungstag, ungefähr in der 22. bis 25. Stunde, wird die einzellige Zygote in zwei Stadien unterteilt. Sie verwandeln sich nach 42-44 Stunden in einen vierzelligen Embryo. Am dritten Tag teilt sich der Embryo weiter. Sie erreichen das 6- bis 8-Zellen-Stadium in 66-68 Stunden. Wir klassifizieren Embryonen nach bestimmten Kriterien in diesem Zeitraum, die wir als frühe Teilungsphase bezeichnen.

• Embryo guter Qualität: Zellen gleicher Größe mit transparentem Zytoplasma
• Embryo mittlerer Qualität: mit zytoplasmatischen Unregelmäßigkeiten und / oder leicht unterschiedlichen Zellgrößen
• Embryo mit schlechter Qualität: Die Zellgrößen unterscheiden sich erheblich voneinander und / oder sie weisen ein granuläres oder dunkles Zytoplasma auf

Während sich die Zellen teilen, kann sich etwas Zytoplasma in der Zelle ansammeln. Die Geschwindigkeit und Position dieser Strukturen, die wir Fragmentierung nennen, im Embryo sind wichtig für die Beurteilung der Embryoqualität.

• Embryo 1. Qualität: keine Fragmentierung
• Embryo 2. Qualität:% <10> <! - 10 -> <! - 10 -> <! - 10 -><!--10--><!--10--><!--10-->
• Embryo 3. Qualität: -35 Fragmentierung
• Embryo 4. Qualität:> 35% Fragmentierung

Die Abnahme der Embryoqualität im Frühstadium in Bezug auf die angegebenen Parameter führt dazu, dass die Entwicklung des fortgeschrittenen Stadiums zum Stillstand kommt oder schlecht verläuft.

2. Tag Embryo 1. Qualität (mit 4 Zellen) 3. Tag Embryo 1. Qualität (mit 8 Zellen)

2. Tag Embryo 3. Qualität 3. Tag Embryonen 2. und 3. Qualität

WIE WIRD 4. TAG EMBRYO-GRADING DURCHGEFÜHRT?

 96 Stunden nach der Befruchtung wird der Embryo zu einer mehrzelligen Zelle mit 16 bis 20 Zellen, deren Zellgrenzen nun ausgestorben sind.

4. Tag Embryo 2. Qualität (Morula) 4. Tag Embryo 1. Qualität schneiden

WIE WIRD 5./6. TAG EMBRYO-GRADING DURCHGEFÜHRT?

Der Embryo, der das Niveau von 5 und 6 Tagen erreichte, befindet sich im Stadium, in dem wir die Blastozyste mit zwei differenzierten Zellschichten mit durchschnittlich 100 Zellen bezeichnen. Die innere Zellmasse (ICM) in diesen beiden verschiedenen Zellschichten ist der Teil, aus dem das Baby besteht. Die äußere Zellmasse (Trophectoderm) bildet die Plazenta. Die Qualität des Embryos in diesem Stadium wird durch die Eigenschaften der inneren und äußeren Zellmassen und die Expansion des Embryos bestimmt. Dementsprechend werden Blastozysten wie folgt klassifiziert:

Gemäß der Erweiterung der inneren Höhle des Embryos (BLASTOCOELE)

ERGEBNIS 1:   Beginn der Spaltung im Embryo. Blastocoele (innere Höhle) ist weniger als die Hälfte des Zellvolumens

ERGEBNIS 2:Blastocoele ist mehr als die Hälfte des Zellvolumens

ERGEBNIS 3:Das Volumen der Blastocoele deckte das Volumen des Embryos ab

ERGEBNIS 4:Das Blastocoele-Volumen ist größer als das Volumen des Embryos und die äußere Membran ist dünner

ERGEBNIS 5:Die äußere Membran zerbricht und der Embryo beginnt zu platzen

ERGEBNIS 6: Der Embryo ist vollständig von der äußeren Membran getrennt.

KLASSIFIKATION NACH INNENZELLMASSE (ICM):

A:Enthält eine große Anzahl dicht gepackter Zellen

B:Enthält lose verpackt, aber viele Zellen

C:Enthält lose und sehr wenige Zellen

KLASSIFIKATION NACH AUSSENZELLMASSE (TROPHECTODERM):

A:Enthält eine große Anzahl richtig sortierter Zellen, die eng miteinander verbunden sind

B:Enthält eine kleine Anzahl lose gebundener Zellen

C:Enthält unregelmäßig sortierte lose gebundene große Zellen

5. Tag                    5AA-Embryo                                     6. Tag 6AA-Embryo